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分享一下abcam抗体的保存方法及注意事项
发布时间:2019-01-16   点击次数:348次
   分享一下abcam抗体的保存方法及注意事项,一起来看看。

  1、abcam抗体的保存温度

  对于许多抗体而言,分装为小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下冻存是正好的保存条件。分装抗体可以大限度减少冻融对抗体造成的损坏,还可避免多次从同一管中移取抗体而引入污染。分装后抗体只可冻融一次,如有剩余,应保存在 4 ℃ 下。

  收到抗体后,请以 10,000 × g 离心 20 秒,沉降滞留在管盖螺纹中的溶液,然后分装抗体并将其转移至低蛋白质结合的微量离心管中。分装抗体的量取决于您在实验中常用的量。分装抗体应不少于 10 μL;分装抗体量越少,浓度就越容易受到蒸发以及储存样品管表面吸附的影响。

  在大部分情况下,可在收到抗体之后立即将其保存于 4 ℃ 下,可保存 1 至 2 周。遵循数据表上的保存建议非常重要。

  ?2、abcam抗体的存放注意事项

  切勿冻存酶偶联抗体,而应将其保存在 4 ℃ 下。冻融不仅会影响抗体的结合能力,还会降低酶活性。

  偶联抗体(无论是偶联有荧光染料、酶还是生物素)应保存在深色样品瓶中或用锡箔纸包裹样品瓶。暴露于光下会影响偶联物的活性。荧光偶联物尤其容易发生光致漂白,因此在实验各阶段都应避光保存。

  IgG3 同型抗体的独特之处在于其解冻后容易形成聚集体,因此应始终保存在 4 ℃ 下。

  腹水液中可能含有蛋白酶,因此收到后应尽快冻存。

  ?3、abcam抗体防止污染

  为了防止微生物污染,可将叠化钠加入抗体制备物中,叠化钠的终浓度为 0.02% (w/v)。我们的多款抗体中都含有这种保护剂,其浓度范围为 0.02%-0.05%。数据表的保存缓冲液部分将对此进行说明。

  不使用叠化钠的情况

  如果要用抗体对活细胞进行染色或处理,或者要用抗体进行体内研究,请务必使用不含叠化钠的制备物。这种抗菌剂对大部分生物体都有毒害作用:它会阻断细胞色素电子传递系统。

  叠化钠会干扰涉及胺基的所有偶联反应,因此必须在进行偶联反应之前将其去除。完成偶联反应之后,可使用叠化钠保存抗体。另一种可用的抗菌剂是 0.01% 硫柳汞钠(硫柳汞),这种物质不含伯胺。

  抗体溶液中的叠化钠可通过渗析或凝胶过滤去除。IgG 的分子量为 150,000 Da(IgM 约为 600,000 Da),叠化钠的分子量为 65 Da。截留分子量为 14,000 Da 的微渗析装置可使叠化物顺利扩散出去,而抗体得以保留。

  渗析过程在烧杯中(置于磁力搅拌器上,温度保持 4 ℃)进行,每毫升抗体使用至少 1 升预冷的 PBS,搅拌渗析装置 6 小时。更换 PBS 两次,每次更换后均搅拌至少 6 小时。如有可能,所有材料都应灭菌,并且应在无菌条件下处理所得制备物。

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